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            大鼠肝枯否細胞

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協議為準

            產品型號

            品       牌其他品牌

            廠商性質經銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2022-05-17 09:36:15瀏覽次數:848次

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            貨號 BJ-X97420
            大鼠肝枯否細胞公司*的商品:ENO1+ENO2+ENO3 神經元,肌肉特異性烯醇化抗體 規格: 0.2mlPhospho-PEA15 (Ser104) 磷酸化星形膠質細胞PEA15抗體 規格: 0.1mlnon-muscle Myosin IIA 非平滑肌肌球蛋白2A抗體 規格: 0.2mlA4GALT/CD77 α1,4-半糖基轉移1 規格: 0.2mlNT-3 神經營養因子3抗

            我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,貨期短,價格優,售后齊全。

            產品名稱

            大鼠肝枯否細胞

            規格

            5×10?Cells/T25培養瓶

            貨號

            BJ-X97420

            商品屬性:

            名稱    大鼠肝枯否細胞

            2.組織來源:肝臟組織

            3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

            4.細胞簡介:

            大鼠枯否細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。枯否氏細胞(Kupffer細胞)是肝臟的肝血竇內一些固定于竇壁的巨噬細胞,它能吞噬和清除大部分從腸道來的抗原微粒,并能吞噬和清除肝血竇中的細菌、異物和衰老的紅細胞,并把血紅蛋白分解成。此外,肝巨噬細胞也有處理抗原,誘導T細胞增殖,參與免疫調節的作用。枯否氏細胞和一般巨噬細胞不同,枯否氏細胞不具有增加抗原免疫原性的能力,相反有消除或減弱抗原性的作用。枯否氏細胞能吞噬來自血液循環的抗原抗體復合物和其他有害物質,以消除這些物質對機體的損害。枯否細胞功能障礙可導致腸源性內毒素血癥。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。

            5.方法簡介:

            ()實驗室分離的大鼠肝枯否細胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

            6.質量檢測:

            ()實驗室分離的大鼠肝枯否細胞CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

            7.培養信息:

            培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

            產品貨號CM-R132

            換液頻率每2-3天換液一次

            生長特性貼壁

            細胞形態梭形、巨噬細胞

            傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

            消化液(12mM

            培養條件氣相:空氣,95%CO25%

            細胞培養步驟:

            .培養基及培養凍存條件準備:

            1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

            2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

            3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

            . 細胞處理:

            1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

            2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

            圖片13.jpg 

            細胞培養操作規程:

            一.培養基及培養凍存條件準備:

            1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

            2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

            3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

            二.細胞處理:

            1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

            2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

            對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

            方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

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            操作要點:

            1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。

            2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

            3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。

            4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。

            5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。

            6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

             


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