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兔肺成纖維細(xì)胞品牌返回列表頁

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更新時(shí)間：2025-11-04 13:36:04瀏覽次數(shù)：169次

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貨號	BJ-X97038

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產(chǎn)品名稱	兔肺成纖維細(xì)胞品牌
規(guī)格	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號	BJ-X97038

商品屬性：

名稱 兔肺成纖維細(xì)胞品牌

2.組織來源：肺組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

兔肺成纖維細(xì)胞品牌分離自肺組織；肺是機(jī)體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持肺器官的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

5.方法簡介：

()實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺成纖維細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-Rb008

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

兔肺成纖維細(xì)胞品牌

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

重組小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組食蟹猴 TNFSF10 / TRAIL / APO-2L 蛋白

重組小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組小鼠 TNFSF10 / TRAIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291

大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)elisa試劑盒	Rat cardiac troponin Ⅰ, cTn-Ⅰ Elisa Kit
大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)elisa試劑盒	Rat Phosphotylinosital 3 kinase, PI3K Elisa Kit
大鼠蛋白激酶B(PKB)elisa試劑盒	Rat protein kinase B, PKB Elisa Kit
大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)elisa試劑盒	Rat secretory immunoglobulin A, sIgA Elisa Kit
大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)elisa試劑盒	Rat heme oxygenase 2, HO-2 Elisa Kit
大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)elisa試劑盒	Rat Crosslaps, Cr Elisa Kit
大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)elisa試劑盒	Rat cross-linked C-telopeptides of Type Ⅰ collagen, CⅠCP Elisa Kit
大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)elisa試劑盒	Rat deoxypyridinoline, DPD Elisa Kit
大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)elisa試劑盒	Rat pyridinium crosslink/PyriLinks, PY Elisa Kit
大鼠骨橋素(OPN)elisa試劑盒	Rat Osteopontin, OPN Elisa Kit
大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)elisa試劑盒	Rat Bone-specific Alkphase B, ALP-B Elisa Kit
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)elisa試劑盒	Rat transferrin receptor, TFR Elisa Kit
大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa試劑盒	Rat Factor Ⅷ-related Antigen, FⅧAg Elisa Kit
大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa試劑盒	Rat Pyruvate Kinase, M2-PK Elisa Kit
大鼠γ氨基丁酸(GABA)elisa試劑盒	Rat Gamma-aminobutyric acid, GABA Elisa Kit
大鼠5羥色胺(5-HT)elisa試劑盒	Rat 5-Hydroxytryptamine, 5HT Elisa Kit
大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)elisa試劑盒	Rat substance P receptor, SP-R Elisa Kit
大鼠P物質(zhì)(SP)elisa試劑盒	Rat Substance P, SP Elisa Kit
大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)elisa試劑盒	Rat alpha-L-fucosidase, AFU Elisa Kit
大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)elisa試劑盒	Rat Thyroid-Peroxidase, TPO Elisa Kit

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。