Elisa試劑盒如何添加血清標本？

在ELISA實驗中，規范地添加血清標本是確保結果準確性的關鍵步驟。以下是結合參考資料總結的操作要點：

一、血清標本的添加步驟

1、?樣本準備?：使用無熱原、無內毒素的試管采集血液標本，室溫靜置2小時或4℃過夜使血清析出，然后4℃ 1000×g離心20分鐘，仔細收集上清。

2、?加樣操作?：

使用校準后的微量加樣器，加樣時需垂直懸空加入液體，避免加在孔壁上部或產生氣泡。

加樣速度不宜過快，確保加樣準確性和均一性，避免液體濺出或漏加。

3、?加樣量?：通常每孔加入50μL待測血清樣本，空白孔則加入等量的樣品稀釋液。

4、?溫育?：加樣后，將反應板混勻，置于恒溫箱中孵育（如37℃ 50分鐘）。

二、關鍵注意事項

1、?避免溶血?：溶血樣本中的血紅蛋白可能具有過氧化物酶活性，導致非特異性顯色，影響結果準確性。

2、?防止污染?：加樣時需更換槍頭，避免交叉污染；若液體濺出，需用吸水紙吸干并記錄。

3、?溫度控制?：實驗前需將試劑和樣本平衡至室溫，避免因溫度差異導致反應動力學不一致。

三、常見問題處理

1、?加樣誤差?：若加樣不準（如漏氣或不足），應重新加樣并記錄，不可用槍吸出后補加。

2、?結果異常?：若同一標本多次檢測結果差異大，需檢查加樣操作是否規范。

通過以上規范操作，可有效減少ELISA實驗中的誤差，確保血清標本檢測的可靠性。