抗體特異性驗證實驗流程

來源：上海撫生實業有限公司 2025年11月19日 10:57

抗體特異性驗證實驗是確保抗體能準確識別目標抗原的重要環節，其流程需要根據具體實驗類型和檢測方式進行調整。每種實驗對抗體性能的要求不同，因此實驗流程也有所不同。以下是結合抗體驗證方法和ELISA實驗流程的詳細說明：

一、抗體特異性驗證方法

抗體特異性驗證通常采用兩步法：?靶標特異性確認?和?功能應用驗證。

?靶標特異性確認?：通過免疫沉淀-質譜聯用（IP-MS）、CRISPR-Cas9敲除、RNAi敲低等方法，確保抗體僅與目標蛋白結合。

?功能應用驗證?：驗證抗體在特定實驗中的性能，確保其適用于實際應用場景。

二、ELISA實驗中的抗體驗證

在ELISA實驗中，抗體特異性直接影響結果的準確性。例如：

?雙抗體夾心法?：通過包被抗體和檢測抗體的雙重識別，提高檢測的特異性。

?間接法?：利用二抗放大信號，適用于低豐度靶標的檢測。

三、操作注意事項

?試劑保存?：未使用的酶標板需密封后2-8℃保存，避免受潮或污染。

?孵育與洗滌?：嚴格控制孵育時間（如45分鐘）和洗滌次數（3次），減少非特異性結合。

?顯色與讀數?：TMB底物需避光反應，終止后30分鐘內完成讀數。?

抗體特異性驗證實驗流程應結合多種驗證方法，確保抗體在不同實驗條件下的特異性。建議優先選擇基因敲除/敲降驗證和天然陰性樣本驗證，同時優化實驗步驟以提高結果的可靠性。

相關產品

凡本網注明“來源：儀表網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-儀表網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：儀表網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
本網轉載并注明自其它來源（非儀表網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點或和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。