ELISA試劑盒封閉后的處理步驟

ELISA試劑盒封閉后的處理步驟如下：

1、封閉液的制備：

通常使用5%的牛血清白蛋白（BSA）或脫脂奶粉溶液作為封閉液。將BSA或脫脂奶粉溶解于PBS緩沖液中，配制成5%的濃度。

2、封閉時間：

封閉時間通常為1-2小時，可以是室溫封閉或37℃封閉。封閉時間不宜過長，以免封閉液中的蛋白質與包被抗體發生非特異性結合。

3、封閉操作：

將制備好的封閉液均勻地加入到已包被好的ELISA板中，確保每個孔都被封閉液覆蓋。

4、避免干燥：

在封閉過程中，要確保封閉液不會在孔內wanquan干燥，否則會導致包被抗體的損失或非特異性結合的增加。

5、封閉后的處理：

封閉結束后，倒掉孔中的封閉液，用洗滌緩沖液（如含0.05% Tween-20的PBS）洗滌ELISA板，重復此步驟3-5次，每次洗滌后拍干或用吸水紙輕輕拍干。

6、封閉液的儲存：

封閉液可以在4℃下保存，但不宜長期儲存，因為長時間存放可能會影響封閉效果。如果封閉液中不含防腐劑，最好現配現用。

7、后續檢測準備：

?試劑回溫?：檢測前將標準品、酶標板等試劑室溫平衡15-30分鐘，搖勻后使用。

?避免污染?：操作時使用帶濾芯的槍頭，防止交叉污染。

8、注意事項：

?封閉劑選擇?：若檢測樣本含Fc受體，需使用同源血清封閉（如兔源血清封閉兔源抗體）。

?背景控制?：若出現高背景，可延長封閉時間或更換封閉劑（如BSA→明膠）。?

通過規范操作可確保封閉效果，提升ELISA檢測的準確性和重復性。?