無血清細胞凍存液 返回列表頁

產品屬于：

產品名稱：無血清細胞凍存液    

英文名稱：

貨號：FS-02X0063

規格：100ml   

細胞培養的優點：

細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 Gelsolin (GS)凝溶膠蛋白(GS)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Ki-67 Protein (Ki67P)Ki-67蛋白(Ki67P)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP)脂多糖結合蛋白(LBP)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1)細胞間粘附分子1(ICAM1)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1)胰島樣生長因子1(IGF1)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Noggin (NOG)頭蛋白(NOG)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Apolipoprotein C1 (APOC1)載脂蛋白C1(APOC1)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Interferon Gamma Induced Protein 10kDa (IP10)10kDa干擾γ誘導蛋白(IP10)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Olfactomedin 4 (OLFM4)嗅4(OLFM4)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Fibrinogen Like Protein 2 (FGL2)纖維介蛋白(FGL2)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Salmon Calcitonin (SCT)鮭魚降鈣(SCT)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Terminal Complement Complex C5b-9 (C5b-9)末端補體復合體C5b-9(C5b-9)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIb Receptor (FcgR3B)IgG-Fc片段低親和力受體Ⅲb(FcγR3B)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Sclerostin (SOST)硬骨(SOST)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Complement Factor I (CFI)補體因子I(CFI)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Beta-Lactoglobulin (bLg)β-乳球蛋白(βLg)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Ryanodine Receptor 2, Cardiac (RYR2)心肌型蘭尼定受體2(RYR2)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T

 Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA)血管內皮生長因子A(VEGFA)檢測試劑盒(聯免疫吸附試驗法)規格：48T/96T
無血清細胞凍存液C1orf51  1號染色體開放閱讀框51抗體規格: 0.2ml

C1orf52  1號染色體開放閱讀框52抗體規格: 0.2ml

C1orf67/DNAH14  1號染色體開放閱讀框67抗體規格: 0.2ml

C1orf83  1號染色體開放閱讀框83抗體規格: 0.2ml

AFAP/AFAP-110  微絲相關蛋白1抗體規格: 0.2ml

C1ORF111  1號染色體開放閱讀框111抗體規格: 0.2ml

C1ORF74  1號染色體開放閱讀框74抗體規格: 0.2ml

C1QL2/C1QTNF10  補體C1q和腫瘤壞死因子相關蛋白10規格: 0.2ml