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            NAD激酶(NADK)可見分光光度法檢測試劑盒

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            具體成交價以合同協(xié)議為準
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            • 品牌其他品牌
            • 所在地上海市
            • 更新時間2025-04-01
            • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
            • 入駐年限10
            • 實名認證已認證
            • 產(chǎn)品數(shù)量10000
            • 人氣值358088
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            公司客戶遍布大學、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位。


            公司主推品牌: (進口、國產(chǎn)) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。

             

             

             

             

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            貨號GOY-01S6324
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            NAD激酶(NADK)可見分光光度法檢測試劑盒 產(chǎn)品詳情

            操作步驟:

            實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

            1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

            2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

            3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

            4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

            5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

            6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

            7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

            8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

            NAD激酶(NADK)可見分光光度法檢測試劑盒

            商品屬性:

            產(chǎn)品名稱

            NAD激酶(NADK)可見分光光度法檢測試劑盒

            規(guī)格

            50管/24樣

            檢測方法

            可見分光光度法

            貨號

            GOY-01S6324

            商品介紹:

            測定意義

            NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進行磷酸化反應(yīng),生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。

            測定原理:

            NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT),通過在600 nm下測定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。

            需自備的儀器和用品:

            可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

            實驗方法學:

            一、肝素的配制:

            市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

            肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔510分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

            二、血液樣本的收集:

            全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

            1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

            2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

            選擇抗凝的注意點:

            ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

            ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

            ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

            ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

            用于測定。

            茜素綠 Dye content 95%(R)-1-Boc-3-羥基吡咯烷  98% Anti-Polyprotein (Hepatitis G Virus)  庚型肝炎病多聚蛋白抗體

            燦爛綠 高純級,95%2-(1-基)苯 97%Anti-ZEBRA  人類皰疹病4抗體

            鉍試劑Ⅰ 97%喹唑啉 98%Anti-membrane glycoprotein E(VZV)  人水痘帶狀皰疹病gE蛋白抗體

            鉍試劑II CP三氟磺酸鈧 98%Anti-HHV8/ORF K2  類皰疹病8抗體

            鉍試劑II 98%四氫-2 2-二甲基-4H--4-酮 95%Anti-HHV8/ORF50  人類皰疹病8抗體

            考馬斯亮藍G250 AR三(4-溴苯基) 98%Anti-HHV8/ORF50  人類皰疹病8抗體

            考馬斯亮藍G250 AR,無蛋白2-甲酰基噻唑 97%Anti-HHV8/ORF50  人類皰疹病8抗體

            考馬斯亮藍G250 70%,用于電泳500ml透氣不透液墊片 40mm口徑 配套42mm口徑蓋Anti-HHV8/ORF K2  人類皰疹病8抗體

            NAD激酶(NADK)可見分光光度法檢測試劑盒

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